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Los cambios en el uso del suelo y la pérdida de cobertura vegetal, fenómenos crecientes en el Neotrópico, generan alteraciones fisicoquímicas en los ecosistemas acuáticos que modifican su composición biológica y funcionamiento. Este estudio evaluó la relación entre la diversidad funcional de macroinvertebrados bentónicos y variables ambientales a múltiples escalas espaciales en sistemas lóticos andinos de la cuenca del río Garagoa, Orinoquia colombiana. Se recolectaron macroinvertebrados en 36 sitios y se caracterizó su diversidad funcional mediante 11 rasgos, 49 atributos, y tres componentes primarios: riqueza, uniformidad y divergencia. Para cada sitio se obtuvieron variables ambientales a escala local y de paisaje, organizadas en cuatro conjuntos: 1) condiciones fisicoquímicas en transectos de 100 m, 2) proporción de usos del suelo en la microcuenca, 3) usos del suelo en la red hidrográfica (buffer de 30 m) y 4) usos del suelo en un buffer de 500 m. Los rasgos funcionales de tamaño, respiración, locomoción y duración del ciclo de vida se relacionaron significativamente con variables locales (temperatura, oxígeno disuelto, precipitación, calidad de la vegetación ribereña y composición del sustrato) y de paisaje (áreas agrícolas, pastos para ganadería, industria y extracción minera en escala de microcuenca, red hidrográfica, zonas urbanizadas, vegetación herbácea y bosques). De manera similar, los tres componentes primarios de la diversidad funcional se asociaron significativamente con variables de ambas escalas espaciales. Estos resultados evidencian la importancia de incorporar enfoques multiescala en la evaluación ambiental para la gestión y conservación de los ecosistemas lóticos andinos.